降雨是要挟树种野外生存的严查峻桃战的一个。ABA与JA根据融合用同向管控树种耐旱性，但俩者在降雨积极地响应中的融合管理机制仍不明显。

近期，浙江省本科大学喻景权院土拜谱生物，朱常安院士在Plant Biotechnology Journal期刊上发表题为“ERF.D2 negatively controls drought tolerance through synergistic regulation of abscisic acid and jasmonic acid in tomato”的文章。该研究发现了在番茄耐旱过程中，乙烯响应因子（ERF.D2）的Ser-52位点被钙依赖性蛋白激酶27（CPK27）以ABA依赖性方式磷酸化，随后经历PUB22介导的泛素化降解。ERF.D2的降解导致JA生物合成基因（烯丙稀氧化物环化酶（AOC）和12-氧代植物二烯酸还原酶3（OPR3））的转录水平和内源性JA浓度升高，从而增强番茄的抗旱性。这些发现为理解ABA与JA在番茄抗旱过程中的协同作用机制提供了新视角。拜谱生物工程为该研究成果提供了蛋白酶互作组、磷碱化装饰组检测分析服务。

日文网站标题：ERF.D2 negatively controls drought tolerance through synergistic regulation of abscisic acid and jasmonic acid in tomato （Plant Biotechnology Journal IF：10.5）

汉语名称：ERF.D2通过协同调控脱落酸和茉莉酸负向调控番茄的抗旱性

的客户行业：浙江大学

分析涂料：番茄蛋白冻干粉

拜谱提高技巧：蛋白酶互作组、磷硝化作用掩盖组

高技术途径：

设计最后

01、ERF.D2是CPK27的靶点，负监测番茄的耐旱性

引入ERF.D2敲除变异体（erf.d2）和过形容株系（OE-ERF.D2），干旱气候清理后，erf.d2变异株破损更轻，过形容株抗旱救灾的能力减少（图1a）且离体树叶症状极高的的水分短缺率（图1b）。经由Y2H、co-IP、LCI等检测认定书材料，ERF.D2与CPK27可以的发生相护功用，且ABA清理正相关增強互作抗压强度（图1c-e）。额外经由体内挥发检测和MG132可抑药物制剂清理等检测认定书材料ABA经由增強CPK27与ERF.D2的互作，带动ERF.D2经泛素化有效途径挥发（图1f-i）。

图1 ERF.D2是CPK27的靶点，负改善番茄的耐旱性

02、CPK27磷碱化ERF.D2以把握其核蛋白质含量不稳定义性

鉴于CPK27具有蛋白激酶功能，免疫沉淀和Phos-tag免疫印迹实验表明，CPK27可使ERF.D2蛋白磷酸化，ABA可进一步提高ERF.D2的磷酸化水平（图2a-c）。将MBP-ERF.D2与His-CPK27进行体外磷酸化反应后进行磷过酸装饰组分析。Ser-47和Ser-52被鉴定为潜在的磷酸化位点。点突变验证发现ERF.D2中的Ser-52是由CPK27磷酸化的主要位点（图2d），并且ERF.D2S52A的降解率显著降低（图2e-f）。

图2 CPK27磷碱化ERF.D2以掌握其球高蛋白平衡性

03、PUB22介导磷碱化ERF.D2的泛素化吸附

干旱胁迫下ERF.D2蛋白含量降低（图3a-b)，且外源性ABA处理显著降低了ERF.D2蛋白水平（图3c-d）。通过核蛋白互作组发现关键E3连接酶PUB22，PUB22突变体表现出更明显的抗旱敏感性，而且ERF.D2蛋白能通过ABA依赖性方式直接与PUB22相互作用。表达CPK27时，PUB22介导的ERF.D2泛素化作用显著增强，磷酸化模拟形式的ERF.D2S52D显示出更高的泛素化水平，而ERF.D2S52A时，PUB22介导的泛素化作用几乎完全被阻断（图3e-g）。抑制剂MG132处理，ERF.D2-GFP蛋白的积累量显著增加（图3i-j）。

图3 PUB22介导磷过酸的ERF.D2泛素化可降解

04、ERF.D2阻止AOC和OPR3的表明，负自我调节长时间不降雨水的时候促进的茉莉酸生物学合出

对ERF.D2变异的株和差表株做7天皮肤干燥进行操作，并做转录组测序。在ERF.D2变异的株中，有4713个什么是染色体被调涨，4236什么是染色体被调低（图4b）。这之中1157个什么是染色体只在ERF.D2变异的株的大旱进行操作中调涨（图4c），他们什么是染色体聚集于伤疤想法、茉莉酸结合、脂质代谢率及其茉莉酸想法等海洋植物学的过程 （图4d）。在与JA结合相关的什么是染色体中，AOC和OPR3的抒发标准明显的低于另外什么是染色体（图4e），并能够得到查证（图4f-g）。在后面实验所中证明格式了ERF.D2与AOC和OPR3初始化子完美做用。

图4 ERF.D2限制AOC和OPR3的表答，负国家宏观调控旱涝诱导型的茉莉酸海洋生物制作而成

好文章个人心得体会

本实验呈现了ERF.D2在ABA与JA旱情胁迫互作中的重要性枢纽站效应。ABA促活的CPK27介导的ERF.D2磷过酸进程，增强学习了其被PUB22泛素化的使用率，较低其缓和茉莉酸动物合出的效应，以此加快番茄抗旱救灾本事（图5）。

图5 ABA-ERF，D2-JA调节草本植物抗涝应激反应实体模型

拜谱总结

本研究首次揭示了ERF.D2作为ABA与JA信号交叉的关键节点，阐明“ABA诱导ERF.D2磷酸化-泛素化降解-JA合成增强”的协同机制。该研究成果中拜谱海洋生物为其提供蛋清互作组、磷碱化突显组的检测与分析。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的淀粉酶质组学、掩盖组学、代谢转化组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

参阅文章：Zhu C, Li X, Zhang M, et al. ERF.D2 negatively controls drought tolerance through synergistic regulation of abscisic acid and jasmonic acid in tomato. Plant Biotechnol J. Published online May27, 2025. doi:10.1111/pbi.70157